紫外分光光度法中是如何测定大豆异黄酮含量的?
大豆异黄酮是大豆生长过程中形成的一类次级代谢产物。相关研究发现,大豆异黄酮对人体具有多种生理功能,可预防骨质疏松症,作为雌性激素替代品改善女性更年期综合症、降低绝经妇女的血脂水平,还具有抗菌、降低患乳腺癌的风险、预防前列腺癌等多种功能,是一种很有潜力的癌症化学预防剂。
大豆异黄酮含量的测定方法较多,如:纸色谱法、薄层色谱法、气相色谱法和高效液相色谱法等。纸色谱法、薄层色谱法存在定量不准确,分离效果差等不足;气相色谱法操作较繁琐,容易受杂质干扰;HPLC法能较准确地检测几种主要类型的大豆异黄酮,但设备运行费用较高,检测时间较长,特别是在摸索提取工艺条件过程中需要多次及时地检测提取物只能大豆异黄酮的含量,不利于生产上大规模操作,因此寻找一种大豆异黄酮的快速测定方法显得尤为重要。
仪器准备
紫外可见分光光度计采用全新设计的比例监测双光束学系统,具有优良的光学性能,使用方便,是实验室分析必备的基本仪器之一。
样品液的制备:
新鲜豆渣在60℃条件下鼓风干燥48h至恒重,过20目筛,用石油醚脱脂24h,去除滤液,烘干滤渣。采用超声波法提取豆渣中大豆异黄酮,称取已处理豆渣粉5.0g(过20目筛),溶于40mL80%的乙醇溶液中,提取温度60℃,超声提取时间为30min,提取液过滤,置于50mL容量瓶中,95%乙醇定容至刻度。
测定结果:
紫外可见分光光度计应用于各种涉及水和废水分析领域的通用仪器,应用范围包括市政和工业废水、饮用水、加工过程用水、地表水、冷却水和锅炉补给水等。
豆渣是大豆加工中的副产物之一,产量丰富,目前主要是当作饲料用或肥料处理掉,利用率极低。研究表明,豆渣中同样含有异黄酮,作为黄酮醇类化合物,大豆异黄酮在紫外光区有较强吸收。现基于超声波辅助提取法对豆渣中的大豆异黄酮提取物中的大豆异黄酮含量,以期为豆渣资源的综合利用提供一定的参考。