安捷伦1260液相色谱仪操作规程
一、开机
1）打开计算机，登陆windows操作系统。
2）打开主机各模块电源（从上至下），待各模块完成自检后，再双击桌面“仪器1联机”图标，进入化学工作站，从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面。
3）把各流动相放入溶剂瓶中。
4）旋开排气阀（逆时针），右单击“四元泵”图标出现快捷键，点击“方法”选项进入泵编辑画面。将泵流量设到5ml/min，溶剂A设到100%，打开泵，排出管线中的气体2—3分钟，直到管线内由溶剂瓶到泵入口无气泡为止，查看柱前压力（若大于10bar，则应更换排气阀内过滤白头）。
5）依此切换到B、C、D溶剂分别排气。
6）将泵的流量设到0.5ml/min，多元泵则再设定溶剂配比，如A=80%，B=20%；关闭排气阀（顺时针）。
7）再将泵的流量设到0.8ml/min，2分钟后将泵的流量设到1ml/min，冲洗色谱柱20—30分钟。
8）把缓冲液换成流动相，待柱前压力基本稳定后，打开检测器灯，观察基线情况。
二、数据采集方法：
1）编辑样品信息：由“运行控制”进入“样品信息”，设定操作者姓名，样品数据文件名等。
2）编辑完整方法：从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项。选中项单击“确定”入下一画面“方法注释”，编辑好单击“确定”进入下一画面“选择进样源”，选中Als单击“确定”入下一画面“设置方法”进行参数设定。
3）四元泵参数设定：在“流速”处输入流量，如1ml/min，在“溶剂”处选中B输入80%（A=100-B-C-D），在右面注释栏中标明各溶剂的名称；设置“停止时间”和“后运行时间”，在“压力限值”处输入柱子的耐高压以保护柱子如：250bar，在“时间表”添加编辑梯度。
4）进样器参数设定：在进样模式中输入进样量xxul。“标准进针”——只能输入进样体积此方式无洗针功能。“针清洗后进样”——可以输入进样体积和洗瓶位置为xx，此方式针从样品瓶抽完样品后会在洗瓶中洗针。
5）进样器进样程序参数设定：选中使用进样程序，在“函数”中添加相应函数即可按程序进样。
6）TCC检测器参数设定：在“温度”左侧下面的方框内输入所需温度，并选中它，右侧选中“与左侧相同”——使柱温箱的温度左右一致。
7）VWD检测器参数设定：在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长，如254nm，在“峰宽（响应时间）”下方点击下拉式三角框，选择合适的响应时间，如>0.1min（2s），再设置“停止时间”和“后运行时间”。
8）仪器曲线设置：默认即可。
三、数据处理：
1）从“视图”菜单中单击“数据分析”进入数据分析画面
2）从“文件”菜单选择“调用信号”选中您的数据文件名，单击“确定”。
3）谱图优化，从“图形”菜单中选择“信号选项”从“范围”中选择“自动量程”及合适的显示时间单击“确定”，或选择”自定义量程”调整，反复进行直到图的比例合适为止。
4）积分：从“积分”中选择“自动积分”，积分结果不理想，再从菜单中选“积分事件”，选项选择合适的“斜率灵敏度，峰宽，小峰面积，小峰高”。从“积分”菜单中选择“积分”选项则数据被积分。如积分结果不理想则修改相应的积分参数直到满意为止。单击左边图标将积分参数存入方法。
5）校正表设计：点击“校正”菜单中的“校正设置”，给出各个参数：点击“确定”；调出建立校正表所需的谱图并对谱图进行图形优化和积分优化；点击“校正”菜单中的“新建校正表；在“新建校正表”栏里选定“自动设定”点击“确定”；在“校正表”中给出正确的“化合物名”和“含量”；如需增加校正点数，给出第二校正点的“含量”，校正表建立完成后点击“确定“，点击“保存图标”将校正表存入方法中。
6）打印报告：从“报告”菜单中选择“设定报告”选项进入画面：单击“定量结果”框中“定量”右侧的黑三角选中“百分比法”面积百分比其它选项不变单击“确定”。从“报告”菜单中选择“打印”则报告结果将打印到屏幕上如想输出到打印机上则单击“报告”底部的“打印”钮。
四、关机：
1）关机前，用95%水冲洗柱子和系统0.5—1小时，流量0.5—1ml/min，再用100%有机溶剂冲0.5小时，然后关泵。
2）退出化学工作站，及其它窗口，关闭计算机（用shutdown关）。
3）关掉主机电源开关。
五、注意事项：
1）氘灯是易耗品，应开灯，不分析样品即关灯。
2）开机时，打开排气阀，100%水，泵流量5ml/min，若此时显示压力>10bar，则应更换排气阀内玻璃料。
3）流动相使用前必须过滤，不要使用多日存放的蒸馏水（易长菌）。
4）流动相使用前必须进行脱气处理，可用超声波振荡10-15min。
5）配制90%水+10%异丙醇，以每分2—3滴的速度虹吸排出，进行seal-wash，溶剂不能干涸。
6）当使用缓冲溶液时，要用水冲洗手动进样器进样口，同时搬动进样阀数次，每次数毫升。