毛细管电泳仪检测器的选择
毛细管电泳仪(CE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力;
利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展;
使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能,也使蛋白质和核酸等生物大分子分析有了新的转机。
由于CE溶质区带的超小体积的特性导致光程太短,而且圆柱形毛细管作为光学表面不够理想,对检测器灵敏度要求相当高,检测是CE分析的关键。
小分子检测:
1、有紫外吸收:
首先选择二极管阵列检测器或UVD。
2、无紫外吸收:
(1)可衍生化:可先采用衍生的方法,再用UVD检测,如氨基酸和还原性糖等。
(2)不可衍生化:可采用间接紫外法用UVD检测,也可用电化学检测器检测。
3、有荧光或需要高灵敏度检测:可用LIFD检测。
4、需要测定结构或难以用光学检测器检测:可用MS检测。
大分子检测:
1、蛋白质和核酸:
(1)首先选择UVD。
(2)需要高灵敏度检测:可采用柱前或柱上衍生的方法标记荧光,再用LIFD检测。
(3)需要特异性检测:可使用特异性荧光探针标记后,再用LIFD检测。
(4)需要测定分子量或氨基酸序列:可用MS检测。
2、多糖:
(1)含量较高的多糖:可采用末端吸收法用UVD检测。
(2)含量较低的还原性多糖:可采用衍生试剂标记后,再用LIFD和UVD检测。